Freier Formaldehyd

Falls nichts anderes vorgeschrieben ist, wird Methode A angewendet.
Methode B ist für Impfstoffe geeignet, bei denen Natriumdisulfit zur Bindung von überschüssigem Formaldehyd verwendet wurde.

Methode A

Impfstoffe für Menschen werden im Verhältnis 1 zu 10 verdünnt, bakterielle Toxine für den veterinärmedizinischen Gebrauch werden 1 zu 25 verdünnt.
1 ml der Verdünnung wird mit 4 ml Wasser R und 5 ml Acetylaceton-Lösung R1 versetzt.
Das Reagenzglas wird 40 min lang in ein Wasserbad von 40 °C gestellt.
Die Referenzlösung wird gleichzeitig und unter gleichen Bedingungen unter Verwendung von 1 ml einer Verdünnung der Formaldehyd-Lösung R hergestellt, die 20 µg Formaldehyd anstelle der Prüflösung enthält.
Die Lösungen werden in vertikaler Durchsicht geprüft.

Das gebildete Reaktionsprodukt 3,5-Diactyl-1,4-dihydrolutidin ist auch zur quantitativen Auswertung mittels der Photometrie geeignet (λ_max 412 nm, ε 8000)
Die Reaktionszeit zur Ausbildung der Farbe ist stark von der Temperatur abhängig, so sind bei 20 °C etwa 5 h notwendig, bei 58 °C jedoch nur noch 5 min.
Bei Einhaltung der Reaktionsbedingungen soll die Reaktion sehr spezifisch sein, einzig Acetaldehyd bildet in viel langsamerer Reaktion ein Diacetyldihydrocollidin (λ_max 388 nm).
Das Arzneibuch begrenz den Gehalt an freiem Formaldehyd auf 200 ppm bei Impfstoffen für den Menschen und 500 ppm bei bakteriellen Toxinen für die Veterinärmedizin.